شوية عملي بتاع ميكرو

البكتريا في المختبر تنقسم إلى نوعين اعتمادا على صبغة اسمها جرام ستين (gram stain):

1- جرام بوسيتيف , gram-positive bacteria لونها (بنفسجي)
2- جرام نيقتيف gram-negative bacteriaلونها (بمبي أو احمر)





هنا نوضح الفرق بين النوعين:


ملاحظة: مع الوقت تقدر تفرق بين الاتنين من غير ماتصبغ بس بالنظر الى الاجار
]
1- الgram-positive bacteria تطلع نقط صغيييييييرة
2-ال gram-negative bacteria حجمها اكبر من gram-positive bacteria

الادوات اللي نستخدمها:
1- الاجار (Agar) :


هو مادة زى الجل بتتجمد عن درجة حرارة 40 و اقل وتقعد متجمدة إلى درجة 90 أو 100 درجة مئوية. وهذا الاجار بنزرع علية البكتريا.

و منه عده أنواع:

a) Blood Agar: هذه تسمح بنموا جميع أنواع البكتريا
Gram negative and Gram-positive species




2- MacConkey Agar لون الاجار اصفر.
هذه المديا تسمح بنموا الجرام نيجاتيف بكتريا (gram-negative bacteria) فقط ولا تسمح بنمو الجرام بوسيتيف (gram-positive bacteria).

وأيضا تصنفلك ال gram-negative إلى نوعين :
i. lactose fermentation (بكتريا تخمر اللاكتوز) لونها يطلع (بمبا)
ii. non- lactose fermentation (بكتريا لا تخمر اللاكتوز) يطلع لونها (اصفر) أو نفس لون الاجار




3- Mannitol salt agar لون الاجار (بمبي):
هذه المديا تسمح بنموا Staphylococcus بكتريا فقط
ونحن نستخدم هذه المديا عشان نفرق Staphylococcus بكتريا عن بعضهم , نحن نبحث عن Staphylococcus aureus هذه بكتريا خطيرة تسبب أمراض وبعض الأحيان ما تعالج.وان كانت موجودة تحول لون الاجار من البمبا إلى اللون الأصفر وهذا دليل انه البكتريا Staphylococcus aureus. أما الأنواع الأخرى تقعد بمبي





4- M.R.S.A.: Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus:

للتعرف على ال Staphylococcus aureus اللي تكون مقاومة لعلاج ال Methicillin
وهذا الشئ خطير على المريض لأنه لايوجد علاج بعد كدا فعال إلا شأ جدا غالي.


Xylose Lysine Desoxycholate Agar -5
هذه تسمح لنموا gram-negative bacteria فقط وأيضا تفرق السالمونيلا والشيجلا (Salmonella-Shigella species) عن باقي ال gram-negative bacteria


أنواع العينات :
i. تجي في على عود طويل وفي نهاية قطنه بعد اخذ العينة يتم وضعها في جل من اجل أن نحافظ على الميكروب لايموت (يحتوي على مواد غذائية يعني) وهذه العينات ممكن تتحصل عليها من:



• عينات الأنف
• افرازات العين و الاذن
• من الاجراح
• المهبل
ii. بول (للمعلومة البول طبيا لا يحتوي ولا على أي بكتريا يعني المفروض يكون نقي 100%)
iii. و البراز
iv. ماء
v. أنابيب صغيرة حقت القسطرة

طبعا بعد ماتجيك العينات راح تزرعها على الاطباق اللي قولتلكم عليها

طبعا راح تكون عندك في المختبر جدول او ورقة لكل نوع عينة

يعني عينة العين (ازرعها على كدا وكدا)
عينة البراز : ازرعها على كدا وكدا يعني ماراح تخربطوا انا حاولت ادور على اللستة بس مني محصلها

ان حصلتها راح انزلها.

طريقة زرع العينة:






النتيجة(بكتريا مزروعة على الطبق)




واهم حاجه خلوها في بالكم القسم العلوي من الجسم نحن بنبحث عن جرام بوسيتيف (عينات:العين ,الحلق, الاذن....الخ) اما الجزء السفلي نحن بنبحث عن الجرام نيجتيف بكتريا (في البول والبراز)

Pathogenic Gram-positive cocci (جرام بوسيتيف الممرضة)

STAPHYLOCOCCI and theSTREPTOCOCCI هة النوعين اللي دائما بنبحث عنهم لانهم يسبو الامراض اما . Micrococci فا ماتسبب مرض

Pathogenic Gram-positive؟(العصوية) Bacilli
اهم انواع هذه الطائفة
Bacillus anthracis, هذه تسبب الجمرة الخيثة

and Bacillus cereus . تسبب تسمم الغذاء

Gram-positive (الحلقية) rods
Clostridium perfringens هذه تسبب غرغرينا

Pathogenic Gram-negative cocci
اهمهاNeisseria meningitidis

Pathogenic Gram-negative bacilli
Escherichia coli, salmonellas, shigellas

طيب كيف راح تتعرف على هذه الكائنات من الطبق اللي زرعت فية العينة حقتك؟

اول خطوة Gram-staine :عشان تعرف اول حاجة هل هي جرام نيجتيف ولا بوسيتف
(Gram-negative, Gram-positive)

ملاحظة : مع الخبرة تعرف من غير لاتصبغ "عن طريق حجم المستعمرة البكترية على الطبق ان كان حجم المستعمرة صغيرة (بوسيتيف) وان كان كبيرة (نيجاتيف) الحجم وليست الكمية!!





طيب عرف هي نيجتيف او بوسيتيف اي الخطوة اللي بعدها