الرئيسية
أحدث الصور
من طرف ملخص الجزء العملي
المحتوى العملي للمقرر
علم الأحياء الدقيقة العامة 231 BIO
1- مقترحات وإرشادات عامة للعمل في مختبرات الأحياء الدقيقة .
· تعلم الطريقة الصحيحة لكتابة التقارير العملية .
· التعرف على بعض الأجهزة والأدوات المستعملة في المختبر .
· التعرف على المجهر الضوئي وأجزائه استعمالاته وطريقة المحافظة عليه.
· التعرف على المجهر الإلكتروني بنوعيه .
· التعرف على شروط السلامة الصحيحة في المعمل والتوقيع عليها من قبل الطالبة .
2- دراسة أشكال الخلايا البدائية النواة وحقيقة النواة المختلفة للكائنات الحية الدقيقة من حيث الحجم والشكل ونظام ترتيب الخلايا والحركة مع الأمثلة عليها .
3- دراسة التعقيم وطرقة المختلفة في الدراسات المختبرية .
· التعرف على بعض بيئات النمو الخاصة ببعض الكائنات الحية الدقيقة معملياً .
· تحضير بعض البيئات الغذائية الصلبة والسائلة للكائنات الحية الدقيقة معملياً .
4- عزل بعض الميكروبات البكتيرية من مصادر مختلفة ودراسة شكل النمو على البيئة .
5- دراسة بعض طرق تنقية و حفظ الميكروبات البكتيرية المعزولة سابقاً بطرق مختلفة (على الآجار المائل أو النيتروجن السائل أو باستخدام جلسرول 10% أو بالتجفيد أو باستخدام التربة المعقمة .
6- تجهيز المعلق البكتيري ودراسة الحركة وعد البكتريا في المعلق الميكروبي باستخدام
(الميكروسكوبي الضوئي والعكارة وذلك لرسم منحى النمو).
· دراسة الصفات المزرعية لمستعمرات البكتيرية المختلفة المعزولة سابقاً .
7- التعرف على طرق الصبغ المختلفة المستخدمة لصبغ الخلايا البكتيرية
· الصبغ البسيط .
8- استخدام صبغة جرام .
9-استخدام صبغ الخلايا البكتيرية المتجرثمة .
10 – دراسة الأعجفان والفطريات المختلفة وحيدة الخلية والخيطية وزراعتها على بيئاتها
الفطرية.
11- التعرف على تصنيف وتقسيم الفطريات .
12- التعرف على تصنيف وتقسيم الطحالب والأوليات .
13- التعرف على الفيروسات ودراسة أشكالها .
الدرس العملي الأول : الأدوات والأجهزة المستخدمة في المختبرات
Laboratory Equipment and Tools
بعض الأدوات والأجهزة المستخدمة في المختبرات:
1) المجهر الضوئي (The Light Microscope) . يستعمل لفحص الكائنات الحية الدقيقة التي لا ترى بالعين المجردة.
2) جهاز التعقيم (Autoclave) .يستعمل لقتل جميع الكائنات الحية الدقيق فى الوسط أو الأدوات المراد تعقيمها.
3) الحاضنة أو الحضان (Incubator) . يستعمل لتحضين المزارع البكتيرية.
4) حمام مائي (Water Bath) . يضبط على درجات حرارية مختلفة حسب الغرض المطلوب, سواء كان إذابة البيئات الصلبة بعد تعقيمها وتجمدها, أو لتوفير درجة حرارة ثابتة وملائمة لاختبار ما.
5) جهاز قياس الأس الايدروجينى (PH Meter) . يستعمل لقراءة الرقم الايدروجينى للمحاليل والبيئات.
6) جهاز عد المستعمرات الميكروبية (Colony Counter) . يستعمل لعد المستعمرات البكتيرية النامية على بيئة مناسبة في أطباق بتري في بعض الاختبارات.
7) الميزان الحساس(Delicate scales). يستعمل لوزن بعض البيئات أو المواد الكيميائية بدقة عالية.
أطباق بتري (Petri Dishes) . تصب فيها البيئات المعقمة والتي تستعمل فيما بعد كمزارع للميكروبات.9) الماصات الزجاجية (Glass Pipettes).تستخدم لسحب قياس محدد ومعروف من السوائل المختلفة.
10) الشرائح الميكروسكوبية (Microscopical Slides) .يوضع عليها العينة المراد فحصها.
11) أغطية الشرائح (Cover Slide or Cover Slip) .يتم استعمالها مع الشريحة عند استخدام القوة الصغرى والكبرى للعدسات الشيئية.
12) لهب بنزن (Bunsen Burner) .يستعمل في عملية التعقيم المباشر باللهب.
13) ابر تلقيح البكتيريا ذات عقدة (Inoculating Loop).
14) ابر تلقيح الفطريات (مستقيمة) (Inoculating Needle) .
15) أنابيب لحفظ المزارع الميكروبية (Culture Tubes).
16) ثاقب فلينى (Cork Borer) . يستعمل لعمل ثقب في البيئة النامي عليها الفطر (ديسك). ويستخدم الديسك مقلوبا لزراعة الفطر على أطباق مزرعية جديدة.
17) ماسك شرائح, أنابيب (Holder).
18) ملقط(Forceps) .
19) ورق ترشيح (Filter Paper) .يستعمل لترشيح السوائل والحصول على سائل رائق خالي من الشوائب.
20) دورق مدرج (Flask) .
21) كأس مدرج ذو فوهة متسعة (Beaker) .
22) قمع (Funnel) .
23) مسحة قطنية معقمة (Cotton Swab).يستعمل لاخذ مسحة من مكان محدد لدراسة الميكروبات الموجودة بعد زراعتها على بيئة مناسبة.
24) حامل أنابيب (Rack) .
25) ملعقة مختبر(Spatula – Lab spoon).
المجهر الضوئي : (The Light Microscope)
يختص علم المايكروبيولوجيا بدراسة الكائنات الحية الدقيقة والتي لا ترى بالعين المجردة.
ويعتبر المجهر المركب (Compound microscope) الأداة الرئيسية في الفحص الميكروبي.
لذا فان الفهم الدقيق لأجزائه والمهارة في استعماله يعتبر من المتطلبات الأساسية لأى دراسة في مجال هذا العلم.
يتركب الميكروسكوب الضوئي من عدة أجزاء ميكانيكية وأخرى ضوئية كما يلي:
أولا: الأجزاء الميكانيكية:
· القاعدة Base: وهو الجزء الذي يرتكز عليه الجهاز ويأخذ أشكال مختلفة حسب الشركة المنتجة.
· الذراع Arm: هو الجزء الذي يحمل أنبوبة الميكروسكوب ويتصل بالمسرح, والضوابط.
· المسرح Stage: هو جزء قابل للحركة في أكثر من اتجاه عن طريق ضوابط جانبية, وتثبت عليه الشريحة الميكروسكوبية عن طريق الماسكHolder .
· الضوابط Adjustments وهى نوعين:
- ضابط تقريبي Coarse Adjustment : يستعمل لإظهار الصورة.
- ضابط دقيق: Fin Adjustment : يستعمل لضبط البعد البؤري بدقة.
ثانيا: الأجزاء البصرية:
· الجزء العيني Eye piece للميكروسكوب, يتكون من:
1. العدسة العينية Ocular lens : وهى مثبتة في اعلي أنبوبة الميكروسكوب Microscope tube , وقد تتركب من أنبوبة واحدة وتسمى Monoocular أو من أنبوبتين ويطلق عليها في هذه الحالة Biocular .يتراوح تكبيرها من 6-10 مرات, وقد يركب داخلها قرص مدرج ميكرومتريا, أو مؤشر.
2. الجزء الأنفي Nose piece للميكروسكوب, يتكون من:
العدسات الشيئية Objectiv lenses : وهى مثبته في الجزء السفلى من أنبوبة الميكروسكوب بالقرب من المسرح, على قرص دائري متحرك.
ويوجد ثلاثة أنواع من العدسات الشيئية:
- العدسة الصغرى Low power قوة تكبيرها 4-10x .
- العدسة الكبرى High power قوة تكبيرها 40x .
( تستعمل لفحص الفطريات, الخمائر, الطحالب) عن طريق استخدام التحضير المبتل(Wet preparation) وأغطية الشرائح Cover Slip عند الفحص.
- العدسة الزيتية Oil lens: قوة تكبيرها 100x.(تستعمل لفحص البكتيريا) مع إضافة زيت يسمى السيدر Immersion oil , والغرض الأساسي من استعمال نقطة الزيت هو زيادة الإضاءة...
3. المكثف Condencer :
يوجد المكثف أسفل المسرح.
يتركب من مجموعة من العدسات مرتبة بطريقة خاصة, تعمل على تجميع الأشعة الضوئية.
يمكن التحكم فيه بواسطة ضابط جانبي, لإدخال اكبر كمية من الإضاءة على العينة أو لتقليل كمية الإضاءة.
فكلما زاد تكبير العدسة الشيئية, نحتاج كمية إضاءة اكبر فيضبط على أعلى أوضاعه.
- الحجاب Diaphragm: يوجد أسفل المكثف ويتكون من صفائح رقيقة تتداخل مع بعضها , وبواسطتها يمكن التحكم في كمية الإضاءة التي تمر للعينة.
4. المرآة Mirror:
توجد أسفل المكثف, تعمل على توجيه الإضاءة إلى المكثف.
5. مصدر الإضاءة: Light source لمبة لإصدار الضوء, ويمكن التحكم في شدته.
الحفاظ على الميكروسكوب:
ü لا تلمسي العدسات بأصابعك حتى لا تعلوها سحابة تمنع وضوح الرؤية. وإذا اتسخت امسحيها برفق بالورق الخاص بتنظيف العدسات.
ü لا تتركي الشريحة على المسرح بعد الانتهاء من فحصها.
ü امسحي الزيت من على العدسة الزيتية بعد الاستعمال بواسطة الورق الخاص بتنظيف العدسات, إذا جف الزيت استخدمي الورق المبلل قليلا بالزيلول, مع مراعاة عدم الإكثار منه لأنه قد يتسبب بإذابة المواد اللاصقة للعدسات.
ü يجب الاحتفاظ بالمسرح نظيفا وجافا على الدوام.
ü احملي المجهر بعناية عند نقله من مكان لآخر, ضعي إحدى يديك أسفل القاعدة وباليد الأخرى امسكي ذراع المجهر.
ü عند عدم استعمال المجهر, احتفظ به مغطى.
